同位素標記相對和絕對定量技術(shù)(iTRAQ)
(1)技術(shù)原理
iTRAQ(Isobaric tag for relative and absolute quantitation)是一種新的、功能強大的可同時(shí)對四種樣品進(jìn)行絕對和相對定量研究的方法。iTRAQ試劑為可與氨基酸N端及賴(lài)氨酸側鏈連接的胺標記同重元素(isobaric)。在質(zhì)譜圖中,任何一種iTRAQ試劑標記的不同樣本中的同一蛋白質(zhì)表現為相同的質(zhì)荷比。而在串聯(lián)質(zhì)譜中,信號離子表現為不同質(zhì)荷比(114~117)的峰,因此,根據波峰的高度及面積,可以得到蛋白質(zhì)的定量信息。
(2)技術(shù)應用
機理和調控機制研究,動(dòng)態(tài)過(guò)程中機制研究 ;疾病標志物的篩選,用藥及預后標志物篩選。
【服務(wù)內容】
蛋白提取及定量;iTRAQ試劑標記;液相分離、質(zhì)譜鑒定;數據庫檢索和數據分析;生物信息學(xué)分析。
(1)客戶(hù)須明確檢測目的和具體要求,最好能提供1~2篇文獻或資料。
(2)植物標本:將葉片/花/根/莖/果實(shí)剪下,用無(wú)菌雙蒸水洗凈;用錫箔紙包好后放入液氮或者-80℃冰箱保存。
(3)組織標本:采集新鮮組織,切為小塊,組織塊用冷的PBS或生理鹽水洗凈。將離心沉淀后的組織塊用錫箔紙包裹,樣本放入液氮或-80℃冰箱中保存,干冰運輸。