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免疫沉淀


【技術(shù)簡(jiǎn)介】

(1)技術(shù)原理

免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)是利用抗原抗體特異性反應純化富集目的蛋白的一種方法??贵w與細胞裂解液或表達上清中相應的蛋白結合后,再與Protein AG或二抗偶聯(lián)的agaoseSepharose beads孵育,通過(guò)離心得到beadsprotein AG或二抗-抗體-目的蛋白復合物,沉淀經(jīng)洗滌后,重懸于電泳上樣緩沖液,煮沸510 min,在高溫及還原劑的作用下,抗原與抗體解離,離心收集上清,上清中包括目的蛋白和少量的雜蛋白。

(2)技術(shù)應用

    免疫沉淀常用于測量蛋白質(zhì)抗原的相對分子質(zhì)量,監控其翻譯后修飾,研究蛋白質(zhì)的半衰期等。     

【服務(wù)內容】

蛋白質(zhì)抽取與定量;IP產(chǎn)物的SDS-PAGE;IP(以normal lgG作為對照);western blot或質(zhì)譜分析。

【客戶(hù)須知及標本要求】

1)客戶(hù)須明確檢測目的和具體要求,最好能提供1~2篇文獻或資料;

2)客戶(hù)提供待檢測樣品、免疫沉淀用抗體(也可由我方代購);

3)待檢測樣品可以是直接待檢測蛋白樣品,也可以是細胞、組織或細菌樣品,需加收蛋白抽提費用。樣本收集后應立即-80℃保存。

 

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