甲基化分析服務(wù)-亞硫酸氫鹽測序法（BSP）

【技術(shù)簡(jiǎn)介】

（1）技術(shù)原理

用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA，未發(fā)生甲基化的胞嘧啶被轉化為尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不變。針對要調查的區域設計BSP引物進(jìn)行PCR擴增，對擴增產(chǎn)物進(jìn)行測序就可以判斷哪些CpG位點(diǎn)發(fā)生了甲基化；一般將PCR產(chǎn)物克隆后進(jìn)行測序成功率會(huì )比較高。

（2）技術(shù)應用    

    腫瘤的早期預測、分類(lèi)分級、預后評估及多種疾病的分析；轉錄水平分析：位于啟動(dòng)子區域的甲基化一般會(huì )抑制轉錄；細胞凋亡等調控機制的研究。

【服務(wù)內容】

根據待測基因序列設計相應引物；基因組DNA的提取和質(zhì)量檢測；亞硫酸氫鈉修飾基因組DNA；修飾后DNA純化回收；根據實(shí)驗的要求進(jìn)行BSP或者qMSP實(shí)驗；實(shí)驗結果的分析以及向客戶(hù)提供實(shí)驗報告。

【客戶(hù)須知及標本要求】

（1）客戶(hù)提供：要調查的基因名稱(chēng)、種屬，要調查的甲基化區域或位點(diǎn)；

（2）樣品要求：細胞≥105個(gè)；組織≥100mg；全血≥0.5ml；基因組DNA ≥5μg；所有樣品建議干冰寄送，保持低溫，保證樣品質(zhì)量。