免疫共沉淀

【技術(shù)簡(jiǎn)介】

（1）技術(shù)原理

    免疫共沉淀：免疫共沉淀（Co-immunoprecipitation）是以抗體和抗原之間的專(zhuān)一性作用為基礎的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法，是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。其原理是：當細胞在非變性條件下被裂解時(shí)，完整細胞內存在的許多蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)間的相互作用被保留了下來(lái)。如果用蛋白質(zhì)X的抗體免疫沉淀X，那么與X在體內結合的蛋白質(zhì)Y也能沉淀下來(lái)。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質(zhì)是否在體內結合；也可用于確定一種特定蛋白質(zhì)的新的作用搭檔。

（2）技術(shù)應用

    篩選調控蛋白在基因組上的結合靶點(diǎn)：針對轉錄因子、DNA/RNA 聚合酶、轉錄復合物等調控因子蛋白進(jìn)行特異性的富集，分離純化與之結合的靶 DNA 片段并測序，分析篩選到準確有效的靶位點(diǎn)、靶基因數據；揭示差異化表觀(guān)遺傳變異的原理：通過(guò)對不同表型組織內組蛋白、轉錄因子蛋白及其他結合蛋白進(jìn)行染色質(zhì)免疫共沉淀測序并定量分析靶基因表達調控水平或針對同種組蛋白進(jìn)行甲基化、磷酸化、泛素化修飾所導致的結合位點(diǎn)變異進(jìn)行分析，即可準確揭示差異化表觀(guān)變異原理；研究表觀(guān)遺傳變異疾?。航柚旧|(zhì)免疫共沉淀測序技術(shù)結合生物信息分析揭示由蛋白與 DNA 相互作用變異而引起的疾病的原理，明確表觀(guān)遺傳修飾在癌癥等表觀(guān)遺傳變異疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的具體作用機制。

【服務(wù)內容】

蛋白質(zhì)抽取與定量；SDS-PAGE分離Co-IP產(chǎn)物；Co-IP實(shí)驗（以normal lgG作為對照）；western blot或質(zhì)譜鑒定。

【客戶(hù)須知及標本要求】

（1）客戶(hù)須明確檢測目的和具體要求，最好能提供1~2篇文獻或資料。

（2）客戶(hù)需提供待檢測樣品、免疫沉淀用抗體和WB檢測用抗體（抗體也可由我們代購）；

（3）待檢測樣品可以是直接的待檢測蛋白樣品，也可以是細胞、組織或細菌樣品，但需收取蛋白抽提費用。樣本收集后應立-80℃保存；

（4）免疫沉淀盡量提供未經(jīng)凍存的新鮮蛋白樣品。