蛋白質(zhì)質(zhì)譜鑒定
(1)技術(shù)原理
單一蛋白的質(zhì)譜鑒定:用蛋白酶將蛋白質(zhì)消化成肽段混合物,經(jīng)MAILDI或ESI等軟電離手段將其離子化,然后通過(guò)質(zhì)量分析器將具有特定質(zhì)核比的肽段離子分離開(kāi)來(lái)。通過(guò)實(shí)際譜圖和理論上蛋白質(zhì)經(jīng)過(guò)蛋白酶消化后產(chǎn)生的一級質(zhì)譜峰圖和二級質(zhì)譜峰圖進(jìn)行的比對,進(jìn)行蛋白鑒定。
混合蛋白樣品的質(zhì)譜鑒定:混合蛋白樣品的質(zhì)譜鑒定的方法被稱(chēng)為“鳥(niǎo)槍法”或者多維蛋白質(zhì)鑒定技術(shù)(Mud PIT)?,F將蛋白溶液或SDS-PAGE條帶酶切成肽段混合物,再用高效液相色譜將其分離成簡(jiǎn)單組分,最后依次導入高分辨率質(zhì)譜儀中進(jìn)行質(zhì)量分析。
(2)技術(shù)應用
蛋白質(zhì)表達譜和混合蛋白質(zhì)的鑒定;相互作用蛋白質(zhì)的鑒定;稀有物種的蛋白質(zhì)組鑒定。
【服務(wù)內容】
蛋白質(zhì)樣本制備(客戶(hù)可提供一制備好的樣本,如蛋白溶液或SDS-PAGE條帶),包括蛋白質(zhì)的分離、純化、酶切;蛋白質(zhì)酶切、液相分離、質(zhì)譜鑒定和數據庫檢索。
【客戶(hù)須知及標本要求】
(1)客戶(hù)須明確檢測目的和具體要求,最好能提供1~2篇文獻或資料。
(2)樣品來(lái)源:考染蛋白質(zhì)全部接受;銀染的蛋白質(zhì)不得使用戊二醛作為固定劑;蛋白質(zhì)干粉;蛋白質(zhì)溶液等。
(3)寄送要求:蛋白質(zhì)條帶可用冰袋包裝寄送,蛋白質(zhì)溶液用干冰或液氮寄送。