甲基化特異性PCR（MSP）
【技術(shù)簡(jiǎn)介】
（1）技術(shù)原理
甲基化特異性的PCR是一種靈敏度高且操作相對簡(jiǎn)單的甲基化研究方法。重亞硫酸鹽處理DNA后，基因組DNA發(fā)生的由甲基化狀態(tài)決定的序列改變。隨后進(jìn)行引物特異性的PCR。該方法引物設計是關(guān)鍵。MSP中設計兩對引物，即一對結合處理后的甲基化DNA鏈（引物對M），另一對結合處理后的非甲基化DNA鏈（引物對U）。檢測MSP擴增產(chǎn)物，如果用引物M能擴增出片段，則說(shuō)明檢測位點(diǎn)存在甲基化；若用引物U擴增出片段，則說(shuō)明被檢測的位點(diǎn)不存在甲基化。
（2）技術(shù)應用
腫瘤的早期預測、分類(lèi)分級、預后評估及多種疾病的分析；轉錄水平分析：位于啟動(dòng)子區域的甲基化一般會(huì )抑制轉錄；細胞凋亡等調控機制的研究。
【服務(wù)內容】
根據待測基因序列設計相應引物；基因組DNA的提取和質(zhì)量檢測；亞硫酸氫鈉修飾基因組DNA；修飾后DNA純化回收；根據實(shí)驗的要求進(jìn)行BSP或者qMSP實(shí)驗；實(shí)驗結果的分析以及向客戶(hù)提供實(shí)驗報告。
【客戶(hù)須知及標本要求】
（1）組織樣品：新鮮組織放入液氮或-80度保存，組織不少于100mg；
（2）培養細胞：通過(guò)細胞計數取不少于2×106個(gè)細胞于EP管，加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護劑，混勻后保存于冰箱（-80℃，避免反復凍融）；
（3）血液細胞標本：以抗凝管保存血樣或以淋巴細胞分離液分離細胞后加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護劑，保存（-80℃可長(cháng)期保存，避免反復凍融）；
（4）血清或細胞培養液標本：離心去掉雜質(zhì)后取上清入EP管，保存（4℃可保存15-20天，-80℃可長(cháng)期保存，避免反復凍融）；
（5）樣本運輸：可選擇以下任何一種方式寄送標本
組織樣本、細胞樣本以干冰運輸或加入蛋白保護劑后，加冰袋寄送；
細胞樣本也可直接寄送培養瓶（密封保證不污染、培養液不漏出）；
血清或上清液直接加冰袋寄送（運送視路程遠近2-3天可到達）。
