甲基化分析服務(wù)-亞硫酸氫鹽測(cè)序法（BSP）

【技術(shù)簡(jiǎn)介】

（1）技術(shù)原理

用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA，未發(fā)生甲基化的胞嘧啶被轉(zhuǎn)化為尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不變。針對(duì)要調(diào)查的區(qū)域設(shè)計(jì)BSP引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序就可以判斷哪些CpG位點(diǎn)發(fā)生了甲基化；一般將PCR產(chǎn)物克隆后進(jìn)行測(cè)序成功率會(huì)比較高。

（2）技術(shù)應(yīng)用    

    腫瘤的早期預(yù)測(cè)、分類分級(jí)、預(yù)后評(píng)估及多種疾病的分析；轉(zhuǎn)錄水平分析：位于啟動(dòng)子區(qū)域的甲基化一般會(huì)抑制轉(zhuǎn)錄；細(xì)胞凋亡等調(diào)控機(jī)制的研究。

【服務(wù)內(nèi)容】

根據(jù)待測(cè)基因序列設(shè)計(jì)相應(yīng)引物；基因組DNA的提取和質(zhì)量檢測(cè)；亞硫酸氫鈉修飾基因組DNA；修飾后DNA純化回收；根據(jù)實(shí)驗(yàn)的要求進(jìn)行BSP或者qMSP實(shí)驗(yàn)；實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析以及向客戶提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

【客戶須知及標(biāo)本要求】

（1）客戶提供：要調(diào)查的基因名稱、種屬，要調(diào)查的甲基化區(qū)域或位點(diǎn)；

（2）樣品要求：細(xì)胞≥105個(gè)；組織≥100mg；全血≥0.5ml；基因組DNA ≥5μg；所有樣品建議干冰寄送，保持低溫，保證樣品質(zhì)量。