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科研喜訊:呼吸道病原體核酸檢測產(chǎn)品助力何賢紀念醫院兒科發(fā)表有關(guān)兒童肺炎支原體感染研究成果

2023-03-28 閱讀數:2579

近日,廣州番禺何賢紀念醫院與廣東省婦幼保健院合作研究的一篇研究性論文“Poor accuracy of single serological IgM tests in children with suspected acute Mycoplasma pneumoniae infection in Guangzhou, China”在雜志《Journal of Medical Microbiology》(SCI最新影響因子 3.196)的2023年3月15日刊上得到發(fā)表,文章解決了兒科醫生經(jīng)常碰到的一個(gè)困惑:呼吸道感染抗體MP-IgM常檢出肺炎支原體陽(yáng)性,但是核酸檢測MP為陰性;特別是這樣的患兒使用阿奇霉素治療后還有效,那么是不是MP核酸檢測漏檢了呢?


兒童肺炎支原體感染 #

肺炎支原體(MP)是引起兒童社區獲得性肺炎(CAP)的重要病原體,約占兒童肺炎病例的8%。MP可導致6歲以下兒童的嚴重肺炎,嚴重病例甚至需要轉移至兒科重癥監護病房。臨床檢測MP的方法包括培養法、血清學(xué)法和分子生物學(xué)法等。然而,培養法在臨床診斷上作用較局限,因其耗時(shí)較長(cháng)且靈敏度較低。血清學(xué)和分子生物學(xué)檢測方法在臨床實(shí)踐中則各有優(yōu)勢。血清學(xué)法診斷急性MP感染時(shí),標準的流程是以?xún)纱?em style="box-sizing:border-box;">MP-IgM抗體檢測(急性期和恢復期)且MP-IgM抗體滴度出現4倍增長(cháng)時(shí),認為是MP感染的依據。雖然MP-IgM可比MP-IgG早兩周產(chǎn)生,在感染急性期更有診斷價(jià)值,但MP-IgM也存在檢測窗口期,即可能在MP感染后7-10天內才產(chǎn)生,導致單次MP-IgM檢測并不能很好地在早期判斷患者是否存在MP感染。那么單次MP-IgM檢測的準確度到底是多少呢?本研究以肺泡灌洗液中的MP-DNA檢測為金標準來(lái)判斷這個(gè)問(wèn)題。


#MP感染急性期MP-DNA與MP-IgM的檢測對比 #

樣本于2019年MP感染高發(fā)的一年中收集,入組了144位臨床癥狀表現為支氣管肺炎并入院治療的患兒,每名患兒收集到了1份肺泡灌洗液和對應的血清,有的患兒還收集了急性期和恢復期2份血清,故一共收集了144份肺泡灌洗液與199份血清,當中有46名患兒是經(jīng)過(guò)兩次(間隔≥2天)血清采集。急性入院時(shí)檢測MP-IgM滴度≥1:160則判斷為單次血清檢測的MP感染陽(yáng)性指標。利用懸浮微珠液相芯片多重呼吸道病原體核酸檢測技術(shù)對所有的144份肺泡灌洗液樣品進(jìn)行MP-DNA檢測,以評估血清MP-IgM抗體檢測的可靠性。

研究得出了如下結論:

1、MP-IgM只在急性感染期做單次檢測,滴度為陰性、1:160、1:320、>1:320時(shí),肺泡灌洗液中的MP-DNA陽(yáng)性率分別為58%、55%、57%、62%,說(shuō)明單次MP-IgM檢測為陰性,但實(shí)際58%仍然存在MP感染,這可能與抗體產(chǎn)生存在窗口期有關(guān);而單次MP-IgM為陽(yáng)性,但實(shí)際上約一半并沒(méi)有MP感染,推測是當時(shí)我國處于MP感染的高發(fā)期,上次感染后產(chǎn)生的MP-IgM在體內殘余所導致。同時(shí),MP-IgM單次檢測敏感性為85.5%,特異性?xún)H為25.6%,這就是為什么臨床經(jīng)常碰到IgM抗體為陽(yáng)性,但核酸檢測為陰性的原因;

2、在急性期和恢復期都檢測了MP-IgM時(shí),以MP-IgM滴度上升4倍作為MP感染的標志,則與肺泡灌洗液MP-DNA檢測達到100%一致;

3、有MP感染癥狀,但肺泡灌洗液中沒(méi)有檢出MP-DNA的患者,懸浮微珠液相芯片多重呼吸道病原體核酸技術(shù)檢測發(fā)現了其他的病原體感染,包括1例鼻病毒、1例呼吸道合胞病毒、2例卡他莫拉菌、5例肺炎鏈球菌、1例流感嗜血桿菌、2例百日咳,而這些病原體感染后引起的臨床癥狀和MP感染非常類(lèi)似,使得臨床不容易根據臨床癥狀來(lái)判斷是什么病原體感染,這也是多重病原體核酸檢測的技術(shù)優(yōu)勢;

4、為什么使用大環(huán)內酯類(lèi)藥物治療那些實(shí)際并非MP感染的患兒也能起效?這與該類(lèi)藥物具有免疫調節的功能有關(guān),并不是這些藥物真正殺滅或者抑制了MP,而是阿奇霉素調節了患兒的免疫功能,使得非MP感染的患兒臨床癥狀也得到了緩解。

小結 #

研究主要指出了急性感染期單次的MP-IgM抗體血清學(xué)檢測不能滿(mǎn)足臨床早期診斷的需求,尤其在MP感染高發(fā)的地區,由于MP抗體殘留的原因單次MP-IgM檢測特異性低,出現較多的假陽(yáng)性。但若檢測急性感染期和恢復期的MP-IgM濃度升高變化(即使兩次血清IgM檢測間隔縮短到2天也是有效的),MP-IgM才能準確診斷MP感染。

該研究使用了廣州華銀醫學(xué)檢驗中心提供的懸浮微珠液相芯片多重呼吸道病原體檢測技術(shù),本文作者在文章末尾對我中心表示了感謝。

華銀康呼吸道病原體核酸檢測系列產(chǎn)品 #

廣州華銀醫學(xué)檢驗中心研發(fā)了基于懸浮微珠液相芯片技術(shù)的多重呼吸道病原體核酸檢測系列產(chǎn)品,該產(chǎn)品取樣方便,咽拭子、肺泡灌洗液和痰液等標本均可送檢。技術(shù)方面,我們結合了多重PCR特異性擴增技術(shù)與Luminex懸浮微珠液相芯片技術(shù)平臺,可以快速、準確地檢出組合內呼吸道感染的常見(jiàn)病原體,可靠性經(jīng)過(guò)了多次驗證。近幾年,僅在廣東地區檢測標本量就超過(guò)了20萬(wàn),得到了廣大臨床的認可,為臨床呼吸道感染的早期診斷提供了幫助!在解決精確判斷感染病原體種類(lèi)以便實(shí)施精準治療的臨床問(wèn)題過(guò)程中,由于其技術(shù)含量較高,在解決臨床問(wèn)題的同時(shí),還能產(chǎn)生優(yōu)秀的科研成果!

未來(lái),我們會(huì )繼續致力于不斷研發(fā)新的分子診斷產(chǎn)品,旨在更好的滿(mǎn)足臨床的需求,提供保質(zhì)保量的檢驗服務(wù)!

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